東武伊勢崎線の終着となる伊勢崎駅は、伊勢崎市の北側にあたります。駅はJR両毛線の伊勢崎駅と同居しており、出改札や乗車券類発券はJR東日本に受託していますが、ホームは自前のもので、施設管理や運転業務などは東武鉄道が自前で行っています。
ホームは島式1面2線で、頭端式となっています。ホームを正面に進むと左手に改札があります（中間改札はありません）。自動改札機が入っていますが、パスネットには対応しておらず、また東武鉄道発行の自動改札機対応企画乗車券類にも非対応のものが多いため、有人改札での対応が基本となります。